Turk Hijyen ve Deneysel Biyoloji Dergisi, cilt.76, sa.1, ss.23-30, 2019 (Scopus)
© 2019, Refik Saydam National Public Health Agency (RSNPHA).Objective: Herpesviruses are etiology of various neurological disorders causing morbidity and also mortality in both immunocompetent and immunocompromized children and adults. Viruses play an important role in etiology of encephalitis but their role is still unclear in neurologic diseases such as multiple sclerosis or Guillain-Barre syndrome. Studies revealed that only in few cases, viruses were isolated. But viruses are thought to have a role in triggering the diseases process or progression of the diseases in pathogenesis of neurological disorders, especially in multiple sclerosis. The aim of this study was detection of HSV-1 DNA by Real Time PCR in patients applying to our hospital with neurological symptoms and review of clinical picture in positive patients. Methods: Totally 150 patients whose samples sent to Molecular Microbiology Laboratory between 1 April 2014- 31 January 2016 were included in this study. DNAs were extracted by spin-column method (High Pure Viral Nucleic Acid Kit,Roche,Germany). Amplification was done by Real time PCR method (LightCycler®HSV1/2 QualKit,Roche,Germany) in LightCycler 2.0 (Roche,Germany) device and the results were evaluated qualitatively. HSV-1 IgM and HSV-1 IgG antibody titres of the patients were studied by ELISA (DIA. PRO,Milan,Italy). Results: Totally 164 samples were composed of 82.9% (136/164) CSF and 17.1% (28/164) blood. HSV-1 DNA was found positive for 4.8% (8/164) of samples while all samples were negative for HSV-2 DNA. HSV-1 IgM was positive for 6.2% (2/32) and HSV-1 IgG was positive for 57.9% (11/19) of patients. There was no statistically significant difference between HSV-1 DNA positivity in blood and CSF samples of patients and their ages and gender. Three (50%) of positive patients were associated with Herpes simplex encephalitis, the other positive patients had multiple sclerosis, Wilson disease and Guillain Barre syndromes. Conclusion: Real time PCR is a reliable and sensitive method for giving results in short time to patients with neurological symptoms and detecting low positive results. Thus early treatment prevents sequels. There are studies demonstrating the relation of HSV-1 with neurological disorders especially multiple sclerosis and Guillain Barre syndrome. Therefore, we consider that testing HSV-1 can be sensible for the patients with variable neurological disorders. © 2019, Refik Saydam National Public Health Agency (RSNPHA).Amaç: Herpesvirüsler, immün yetmezliği olan ve olmayan çocuk ve yetişkinlerde görülen, önemli morbidite ve hatta mortalite ile seyredebilen çeşitli nörolojik hastaliklara yol açmaktadir. Bu virüsler ensefalit etiyolojisinde önemli rol oynamakla birlikte multipl skleroz, Guillain Barre Sendromu gibi nörolojik hastaliklardaki rolleri tam olarak bilinmemektedir. Yapilan çalişmalarda bu hastalarin çok az bir kisminda virüs tespit edilebilmiştir. Fakat özellikle multipl skleroz patogenezinde olmak üzere diğer bir çok nörolojik hastalikta virüslerin, hastaliğin tetikleyicisi olabileceği ve hastaliğin ilerlemesinde etkili olabileceği düşünülmektedir. çalişmamizin amaci, nörolojik şikayetleri nedeniyle hastanemizin çeşitli kliniklerine başvuran hastalarda HSV-1 DNA varliğinin real time PCR yöntemiyle saptanmasi ve pozitif bulunan hastalarda klinik tablonun gözden geçirilmesidir. Yöntem: çalişmamiza, Hastanemiz Moleküler Mikrobiyoloji Laboratuvari'na 1 Nisan 2014-31 Ocak 2016 tarihleri arasinda örnekleri gönderilen 150 hasta dahil edilmiştir. Spin-kolon yöntemiyle (High Pure Viral Nucleic Acid Kit, Roche, Almanya) DNA izolasyonu yapilmiştir. I˙zole edilen DNA'lar Light Cycler 2.0 (Roche, Almanya) cihazinda Real Time polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) yöntemiyle (LightCycler® HSV1/2 Qual Kit, Roche, Almanya) çalişilmiş ve sonuçlar kalitatif olarak değerlendirilmiştir. Hastalarin HSV-1 IgM ve HSV-1 IgG antikorlari ELISA yöntemiyle (DIA. PRO, Milano, I˙talya) çalişilmiştir. Bulgular: çalişmamiza dahil edilen 164 örneğin %82.9'u (136/164) beyin omurilik sivisindan (BOS), %17.1'i (28/164) kandan oluşmaktadir. Bu örneklerin real time PCR ile %4.8'i (8/164) HSV-1 DNA pozitif bulunurken, ayni anda çalişilan HSV-2 DNA ise tüm örneklerde negatif bulunmuştur. Seroloji bakilan hastalarin %6.2'sinde (2/32) HSV-1 IgM pozitif bulunurken, HSV-1 IgG ise hastalarin %57.9'unda (11/19) pozitif bulunmuştur. BOS ve kan örnekleri çalişilan hastalarda, HSV-1 DNA pozitifliği ile yaşlari ve cinsiyetleri arasinda istatistiksel olarak anlamli bir fark saptanmamiştir. Pozitif bulunan hastalarin 3 (%50)'ü Herpes simpleks ensefaliti ile ilişkilendirilmiştir. Diğer hastalarin ise multiple skleroz, Guillain Barre Sendromu, Wilson hastaliği gibi tanilari mevcuttur. Sonuç: Güvenilir ve duyarli bir yöntem olan real time PCR sayesinde nörolojik semptomlu hastalara kisa sürede sonuç verilebilmekte, düşük pozitiflikler yakalanmaktadir. Bu sayede tedaviye erken başlanarak sekellerin gelişmesi engellenebilmektedir. özellikle multiple skleroz ve Guillain Barre Sendromu gibi nörolojik rahatsizliklarin da HSV-1 ile ilişkili olabileceğine dair çalişmalar bulunmaktadir. Bu nedenle, diğer nörolojik rahatsizliği olan hastalarda da HSV-1 çalişilmasinin anlamli olabileceğini düşünmekteyiz.